盐酸阿霉素(Doxorubicin Hydrochloride):作用机制详解、实验应用手册及储备液配制标准
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阿霉素(Doxorubicin)盐酸盐生物活性、实验方案及配制方法。
Doxorubicin (Adriamycin) HCl,NSC 123127, DOX,盐酸多柔比星,盐酸阿霉素 (CAS#25316-40-9 目录号D801208)
一、产品基本信息
·产品名称:Doxorubicin (Adriamycin) HCl(盐酸多柔比星,又称盐酸阿霉素)
·目录号:D801208
·纯度:>99%
·外观/性状:粉末状(粉状)
二、生物活性与机制
这是一种有细胞毒性的蒽环类抗生素,用于治疗多种癌症。其主要作用机制是通过嵌入DNA双链中阻断DNA合成,并抑制DNA拓扑异构酶II(TOP2)介导的DNA修复,从而干扰癌细胞的核酸合成。
关键特性:
·靶点:抗肿瘤抗生素,抑制TOP II。
·体内抗肿瘤作用:在携带PC3异种移植瘤的小鼠模型中,4 mg/kg或8 mg/kg的阿霉素可显著延迟肿瘤生长,并降低c-FLIP蛋白水平。
三、实验方案与研究数据
1. 细胞实验(MTT法)
·细胞系:Hela细胞。
·接种密度:将160 μL Hela细胞悬浮液(3×10⁴ cells/mL)分配到96孔板中,孵育24小时。
·给药处理:加入阿霉素(终浓度0.1–2 μM)和辛伐他汀(终浓度0.25–2 μM),孵育72小时。
·MTT检测:每孔加入20 μL MTT溶液(5 mg/mL in PBS)孵育3小时;随后用150 μL DMSO替代培养基,溶解甲臜结晶;最后在540 nm处测定吸光度。
·结果计算:相对存活率 = (实验吸光度 - 背景吸光度) / (未处理对照吸光度 - 背景吸光度) × 100%。
2. 动物实验
·小鼠模型:无胸腺雄性裸鼠(3–4周龄),皮下注射PC3细胞建立异种移植瘤模型。
·给药方案:在肿瘤体积达到约100 mm³时开始治疗,腹腔注射2、4或8 mg/kg阿霉素。
·检测指标:使用数字卡尺测量肿瘤体积,体积 = 宽度² × 长度 × 0.52。
·大鼠模型:SD大鼠(250–300g),按三种方案给药:
o方案1:单次腹腔注射10 mg/kg;
o方案2:每天腹腔注射1 mg/kg,连续10天;
o方案3:每周腹腔注射2 mg/kg,持续5周。
·检测方法:监测血压、心脏功能及生存率。
四、溶解性与制备方案
·溶解度:
o水(H₂O):≥20 mg/mL,100 mg/mL (172.42 mM)
oDMSO:≥29 mg/mL,100 mg/mL (172.42 mM)
o乙醇(Ethanol):不溶
·储备液配制(可参考下表进行精确稀释):
浓度(mg/mL) | 溶剂体积(1mg溶质) | (5mg溶质) | (10mg溶质) |
1 mM | 1.7242 mL | 8.6210 mL | 17.2420 mL |
5 mM | 0.3448 mL | 1.7242 mL | 3.4484 mL |
10 mM | 0.1724 mL | 0.8621 mL | 1.7242 mL |
50 mM | 0.0345 mL | 0.1724 mL | 0.3448 mL |
五、储存条件
·粉末状:-20°C可保存3年。
·溶于溶剂后:-80°C可保存1年。
·常规保存:4°C,避光。
六、用途与免责说明
·用途:仅供科学研究使用,不能用于人体及动物治疗。
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